Introducción: A pesar de su amplio uso en la práctica clínica, la inmunogenicidad de Heberprot-P® y su influencia sobre la eficacia y seguridad de este fármaco se desconoce. Para obtener esta información se necesita optimizar un inmunoensayo que detecte niveles fisiológicamente relevantes de anticuerpos específicos.

Objetivo: Optimizar, mediante un diseño factorial completo, paso a paso, un ELISA indirecto semicuantitativo, para evaluar la inmunogenicidad no deseada contra el Heberprot-P® en suero de pacientes tratados.

Método: A partir de un ELISA inicial, se evaluaron diferentes factores y niveles, mediante diseños factoriales completos, en cuatro pasos del ensayo: recubrimiento de la placa, unión antígeno-anticuerpo, anticuerpo-conjugado y enzima-sustrato. La mejor combinación de factores y niveles en un paso se incorporó para optimizar el siguiente. El diseño experimental concibió un procesamiento estadístico simple.

Resultados: El ELISA optimizado demostró la especificidad del ensayo y logró una detectabilidad de anticuerpos 17 veces superior al inicial.