Evaluación de la línea celular TF1 como biomodelo para estimar la actividad biológica de la NeuroEPO

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Palabras clave:

Palabras claves, NeuroEPO, neurogeneración, neuroprotección, bioensayo

Resumen

Numerosos estudios reportan que en el cerebro se produce una regulación positiva de EPO/REPO, por ejemplo, tras una lesión cerebral, lo que estimuló a los investigadores a explorar desde el principio el potencial neuroprotector y neuroregenerativo de este factor de crecimiento. Una nueva formulación nasal que contiene una EPO recombinante no hematopoyética (NeuroEPO) con acción neuroprotectora en diferentes modelos preclínicos. NeuroEPO protege a las neuronas de los mecanismos que promueven la muerte celular, incluido el estrés oxidativo, la excitotoxicidad, la inflamación, la apoptosis y el déficit cognitivo en modelos de enfermedad de Alzheimer. Sin embargo, la actividad biológica del producto no se ha evaluado en modelos in vitro. Este trabajo tiene como objetivo diseñar y desarrollar un método in vitro para medir la actividad biológica de la NeuroEPO utilizando la línea celular TF1. Para ello, se evaluó primero la expresión del REPO en la línea celular y posteriormente se determinó la proliferación celular en presencia de citocinas (GM-CSF y NeuroEPO) mediante tinción con azul tripán y el índice de proliferación con la proteína Ki-67 mediante citometría de flujo. Se demostró que la línea celular TF1 expresa el REPO y es un modelo in vitro adecuado para evaluar la actividad biológica de la NeuroEPO.

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Citas

1. Babazadeh A, Vahed FM, Liu Q, Siddiqui S A, Kharazmi M S, Jafari SM. Natural Bioactive Molecules as Neuromedicines for the Treatment/Prevention of Neurodegenerative Diseases. ACS omega. 2023; 8(4), 3667-83. doi.org/10.1021/acsomega.2c06098

2. Vittori DC, Chamorro ME, Hernández YV, Maltaneri RE, Nesse AB. Erythropoietin and derivatives: Potential beneficial effects on the brain. J Neurochem. 2021;158(5):1032-1057. doi:10.1111/jnc.15475

3. Hemani S, Lan O, Agarwal S, Yu SP, Woodbury A. Systematic Review of Erythropoietin (EPO) for Neuroprotection in Human Studies. Neurochem. 2021;46: 732–39. doi.org/10.1007/s11064-021-03242-z

4. Kitamura T, Tojo A, Kuwaki T, et al. Identification and analysis of human erythropoietin receptors on a factor-dependent cell line, TF-1. Blood. 1989;73(2):375-80. PMID: 2537111

5. Rama R, Garzón F, Rodríguez-Cruz Y, Maurice T, García-Rodríguez JC. Neuroprotective effect of Neuro-EPO in neurodegenerative diseases: "Alea jacta est". Neural Regen Res. 2019;14(9):1519-1521. doi:10.4103/1673-5374.255968

6. García JC, RodríguezY, González A, Sosa IM. Neuroeritropoyetina por vía Nasal. Retos y perspectivas para la Neuroprotección. Rev Cubana Neurol Neurocir. 2012;2(2):182–200.

7. Galeano AK, Campuzano-Bublitz MA, Kennedy ML. Modelos in vitro utilizados para predecir hepatotoxicidad de medicamentos en la fase pre-clínica. Rev.Cs.Farm. y Bioq. 2021;9(2):50-66.

8. Nar R, Gibbons MD, Perez L, Strouboulis J, Qian Z, Bungert J. TFII-I/GTF2I regulates globin gene expression and stress response in erythroid cells. J Biol Chem. 2025;301(3):108227. doi: 10.1016/j.jbc.2025.108227

9. Winkelmann JC. The human erythropoietin receptor. Int J Cell Cloning. 1992;10(5):254-61. doi:10.1002/stem.5530100502

10. Grossi A, Vannucchi AM, Bacci P, Caporale R, Cappellit G, et al. Erythropoietin upregulates the expression of its own receptor in TF-1 cell line. Leuk Res. 1998;22(2):145-51. doi:10.1016/s0145-2126(97)00134-3

11. Mulcahy L. The erythropoietin receptor. Semin Oncol. 2001;28(2 Suppl 8):19-23. doi:10.1016/s0093-7754(01)90208-8

12. Lee J, Lee S, Kim H. Transcriptomic analysis of erythropoietin receptor expression during erythroid differentiation. Haematologica. 2022;107(5), 1248-59.

13. Uchida M, Watanabe T, Kunitama M, Mori M, Kikuchi S, et al. Erythropoietin Overcomes Imatinib‐Induced Apoptosis and Induces Erythroid Differentiation in TF‐1/bcr‐abl Cells, Stem Cells.2004; 22(4):609-16. doi.org/10.1634/stemcells.22-4-609

14. Souza BDM, Garcia LFR, Bortoluzzi EA, Felippe WT, Felippe MCS. Effects of several storage media on viability and proliferation capacity of periodontal ligament cells. Eur Arch Paediatr Dent. 2020;21(1):53-59. doi:10.1007/s40368-019-00450-8

15. Chan LL, Rice WL, Qiu J. Observation and quantification of the morphological effect of trypan blue rupturing dead or dying cells. PLoS One. 2020;15(1):e0227950. doi:10.1371/journal.pone.0227950

16. Yang J, Chen J, Chang J, et al. IDH2/R140Q mutation confers cytokine-independent proliferation of TF-1 cells by activating constitutive STAT3/5 phosphorylation. Cell Commun Signal. 2024;22(1):116. doi:10.1186/s12964-023-01367-y

17. Wang W, Chen YF, Wei ZF, Jiang JJ, Peng JQ, et al. Microemulsion of Cinnamon Essential Oil Formulated with Tea Polyphenols, Gallic Acid, and Tween 80: Antimicrobial Properties, Stability and Mechanism of Action. Microorganisms. 2023;11(1):2.

doi.org/10.3390/microorganisms11010002

18. Muñoz A, Cardentey J, Paradina L, Rojas L, Figueredo T, et al. Preformulation Studies and Physicochemical Properties of Intranasal Low Sialic Acid Erythropoietin: BioProcess J. 2016; 15(2):45-51.

19. Muñoz A, Montejo AV, Fernández M, Sosa I, García J. Effect of nonionic surfactants and HPMC F4M on the development of formulations of NeuroEPO as a neuroprotective agent. J Adv Pharm Sci Technol. 2014;1(2):22-35. doi:10.14302/issn.2328-0182.japst-13-206

20. Chamorro ME, Wenker SD, Vota DM, Vittori DC, Nesse AB. Signaling pathways of cell proliferation are involved in the differential effect of erythropoietin and its carbamylated derivative. Biochim Biophys Acta. 2013;1833(8):1960-1968. doi:10.1016/j.bbamcr.2013.04.006

21. Karki U, Wright T, Xu J. High yield secretion of human erythropoietin from tobacco cells for ex vivo differentiation of hematopoietic stem cells towards red blood cells. J Biotechnol. 2022;355:10-20. doi:10.1016/j.jbiotec.2022.06.010

22. Chiu PC, Liou HC, Ling TY, Li JS. Development of a Neuroprotective Erythropoietin Modified with a Novel Carrier for the Blood–Brain Barrier. Neurotherapeutics. 2020;17,1184-96. doi.org/10.1007/s13311-020-00845-2

23. Andrés-Sánchez N, Fisher D, Krasinska L. Physiological functions and roles in cancer of the proliferation marker Ki-67. J Cell Sci. 2022;135(11):jcs258932. doi:10.1242/jcs.258932

24. Delahunt B, Bethwaite PB, Thornton A, Ribas JL. Proliferation of renal cell carcinoma assessed by fixation-resistant polyclonal Ki-67 antibody labeling. Correlation with clinical outcome. Cancer. 1995;75(11):2714-19. doi:10.1002/1097-0142(19950601)75:11<2714::aid-cncr2820751113>3.0.co;2-x

25. Kuijpers L, van Veen E, van der Pol LA, Dekker NH. Automated cell counting for Trypan blue-stained cell cultures using machine learning. PLoS One. 2023;18(11):e0291625. doi:10.1371/journal.pone.0291625

26. Ude A, Afi-Leslie K, Okeke K, Ogbodo E. Trypan Blue Exclusion Assay, Neutral Red, Acridine Orange and Propidium Iodide [Internet]. Cytotoxicity - Understanding Cellular Damage and Response. IntechOpen; 2023. Available from: http://dx.doi.org/10.5772/intechopen.105699

27. Robinson JP, Ostafe R, Iyengar SN, Rajwa B, Fischer R. Flow Cytometry: The Next Revolution. Cells. 2023;12(14):1875. Published 2023 Jul 17. doi:10.3390/cells12141875

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Publicado

2026-02-08

Cómo citar

1.
Cruz Yero BM, Ge Vega A de la C, Cedeño Arias M, Rodríguez T, Peña Sánchez V. Evaluación de la línea celular TF1 como biomodelo para estimar la actividad biológica de la NeuroEPO. Rev Cubana Inv Bioméd [Internet]. 8 de febrero de 2026 [citado 8 de febrero de 2026];45:e3786. Disponible en: https://revibiomedica.sld.cu/index.php/ibi/article/view/3786

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ARTÍCULOS ORIGINALES